Agua bacteriostática (BAC):por qué, cómo y cuánto
El agua bacteriostática es el disolvente de referencia para la reconstitución de péptidos de investigación. Esta guía explica su composición, sus ventajas sobre el agua estéril común, los volúmenes a utilizar y los casos excepcionales en los que se requieren alternativas.
¿Qué es el agua bacteriostática?
L’agua bacteriostática para inyección(BAC Water, agua bacteriostática para inyección) es una solución de agua estéril para inyección que contiene0,9% de alcohol bencílicoComo conservante antimicrobiano. Se produce de acuerdo con las normas de la USP (Farmacopea de los Estados Unidos) y la Farmacopea Europea (Ph.Eur).
Su fórmula es sencilla: agua ultrapura estéril + 0,9 % de alcohol bencílico. Nada más. El pH es prácticamente neutro (entre 5 y 7, según la fórmula). Se presenta en frascos de vidrio multidosis con tapón perforado, lo que permite realizar múltiples perforaciones sin comprometer la esterilidad del contenido restante.
El alcohol bencílico (C₆H₅CH₂OH, 0,9%) inhibe el crecimiento bacteriano al alterar la membrana celular bacteriana e inhibir ciertas enzimas respiratorias. A esta concentración, es bacteriostático (inhibe el crecimiento) pero no esterilizante (no elimina las esporas de inmediato). Esto es suficiente para prevenir la contaminación de péptidos multidosis almacenados durante 28 días en refrigeración.
Agua con cloruro de benzalconio frente a agua estéril: una comparación completa
| Criterios | Agua BAC (0,9% de alcohol bencílico) | Agua estéril únicamente (AFI) |
|---|---|---|
| Conservador | Sí — alcohol bencílico 0,9% | No |
| Múltiples punciones (multidosis) | Sí, es seguro durante 28 días. | No — de un solo uso |
| Vida útil posterior a la reconstitución | 28 días (2-8°C) | Máximo 5-7 días |
| Volumen típico de la botella | 10 ml, 30 ml | 2 ml, 5 ml, 10 ml |
| pH | ~5-7 | ~5-7 |
| Compatibilidad con péptidos | Muy grande | De gran tamaño (pero de duración limitada) |
| Esterilidad garantizada | Sí (USP) | Sí (USP) |
¿Cuándo se debe usar agua estéril común?
En dos casos, es preferible utilizar agua estéril sin conservantes:
- El péptido se utilizará endosis únicay el vial se consumió por completo de una sola vez.
- Algunos péptidos muy raros que exhiben unaincompatibilidadCon alcohol bencílico (sensibilidad de los péptidos a los alcoholes): consulte la ficha técnica del producto.
Volúmenes BAC a utilizar: reglas y ejemplos
Principios de cálculo
El volumen de BAC que se debe agregar determina la concentración final. La regla básica es:
Concentración (mg/ml) = Masa del péptido (mg) ÷ Volumen de BAC añadido (ml)
Jeringa de insulina U-100: 1 ml = 100 unidades → 1 unidad = 0,01 ml = 10 µl
Tabla de configuraciones prácticas
| cantidad de péptidos | BAC añadido | Concentración | Dosis 0,25 mg | Dosis 0,5 mg | Dosis 1 mg |
|---|---|---|---|---|---|
| 5 mg | 1 ml | 5 mg/ml | 5 unidades | 10 unidades | 20 unidades |
| 5 mg | 2 ml | 2,5 mg/ml | 10 unidades | 20 unidades | 40 unidades |
| 10 mg | 2 ml | 5 mg/ml | 5 unidades | 10 unidades | 20 unidades |
| 10 mg | 5 ml | 2 mg/ml | 12,5 unidades | 25 unidades | 50 unidades |
| 20 mg | 4 ml | 5 mg/ml | 5 unidades | 10 unidades | 20 unidades |
| 20 mg | 10 ml | 2 mg/ml | 12,5 unidades | 25 unidades | 50 unidades |
Elija un volumen de tanque que produzcanúmeros enteros de unidadespara su dosis objetivo. Por ejemplo, para una dosis de 0,5 mg con 10 mg de péptido, añadir 2 ml (= 10 unidades) es mucho más práctico y preciso que añadir 3 ml (= 6,67 unidades, que no se pueden leer directamente).
Protocolo de uso de agua de BAC
Guarde el recipiente en el refrigerador.
Una vez abierto, el agua BAC se puede conservar refrigerada (entre 2 y 8 °C) hasta 28 días. Transcurrido este tiempo, sus propiedades conservantes disminuyen y existe riesgo de proliferación microbiana. Anote la fecha de apertura en la botella.
Desinfecta el tapón antes de cada perforación.
Aunque el BAC es bacteriostático, desinfectar el septo con alcohol isopropílico al 70 % antes de cada punción sigue siendo una buena práctica. Déjelo secar durante 30 segundos.
Utilice una jeringa limpia para cada punción.
Nunca vuelva a introducir una aguja usada en el vial de BAC. Esto introducirá contaminantes en el vial y comprometerá todas las reconstituciones futuras.
Succiona suavemente
Extraiga lentamente el volumen deseado para evitar la formación de burbujas. Si se forman burbujas, golpee suavemente la jeringa y empuje el émbolo hacia arriba para expulsarlas antes de inyectar el péptido en el vial.
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Ácido acético diluido (0,6% — 0,1 M)
Se utiliza para péptidos que no se disuelven en agua neutra o que precipitan a pH neutro. Es típico de péptidos básicos (como el CJC-1295 sin DAC, análogo de GHRH). El ácido acético diluido reduce ligeramente el pH y mejora la solubilidad de estos péptidos.
- Preparación: 0,35 ml de ácido acético glacial puro + 99,65 ml de agua estéril = solución al ~0,6 %
- O bien, utilice ácido acético 0,1 M ya preparado (pH ~2,9).
- Debe ser estéril y apto para inyección.
DMSO (dimetilsulfóxido) a baja concentración
Disolvente universal utilizado para péptidos altamente hidrofóbicos (lipofílicos). Raramente se utiliza para péptidos de investigación estándar. Su concentración suele ser ≤ 10 % en agua estéril. El DMSO es biológicamente activo y puede afectar a los modelos experimentales; úselo con precaución.
PBS (solución salina tamponada con fosfato)
Para ciertos protocolos de cultivo celular, se puede utilizar PBS. Desventaja: no contiene conservantes antimicrobianos; su uso solo es posible inmediatamente después de su reconstitución.
Agua BAC disponible en MyPeptide
Nuestra agua bacteriostática de grado USP está disponible en frascos de 10 ml con un tapón multidosis. Se produce según las normas de las farmacopeas europea y americana, lo que garantiza la esterilidad y la concentración correcta de alcohol bencílico.
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